注意事项:
1. BCA法也可使用分光光度计测定,并根据比色皿的检测体积,适当加大BCA工作液用量,标准品和待测样品用量不变。
2. BCA法蛋白浓度测定试剂受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)、尿素、蔗糖和脂类的影响,应保证蛋白样品中不含有以上试剂。
3. BCA工作液与样品混合后,可以37 ℃ 孵育30 min,也可以室温放置2 h。
4. BCA法测定蛋白浓度时,工作液颜色会随着孵育时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果样品中的蛋白浓度较低,可适当延长孵育时间。