问题 | 可能原因 | 解决方案 |
纯化的外泌体浓度低 | 样品用量较少。 | 增加纯化体系中的样品量，或扩大纯化体系。 |
样品反复冻融，外泌体破坏。 | 使用新鲜的样品。 |
试剂盒过期。 | 使用保质期内的试剂。 |
磁珠冻存，吸附外泌体能力降低，甚至消失。 | 更换新的磁珠或试剂盒。 |
未按规定体积添加磁珠，磁珠用量减少。 | 按照纯化体系要求，使用正确体积的磁珠。 |
未按照纯化体系要求，随意更改纯化体系中各试剂比例。 | 按照纯化体系要求，按比例添加试剂盒中的各成分到纯化体系中。 |
未按照说明书操作。 | 孵育方式与洗脱强度等实验操作请严格按照说明书进行。 |
磁珠与样品孵育时间偏短。 | 延长孵育时间。 |
洗脱强度偏低。 | 增加Vortex强度，延长Vortex时间。 |
洗脱液体积偏大 | 减少洗脱液用量。 |
提取的外泌体蛋白浓度低 | 纯化的外泌体浓度较低。 | 参见上述解决方案。 |
外泌体蛋白提取试剂的裂解能力较弱。 | 使用裂解能力强的蛋白提取试剂，或本公司生产的外泌体蛋白提取试剂盒（Ome-04）。 |
本试剂盒纯化的外泌体纯度高，几乎不含杂蛋白。 | 增加外泌体浓度。 |
提取的外泌体蛋白中杂蛋白增多 | 样品与磁珠孵育时间过长，导致杂蛋白非特异性吸附。 | 减少样品与磁珠的孵育时间。 |
提取的外泌体miRNA浓度低 | 外泌体浓度偏低 | 参见上述解决方案。 |
常见问题与分析
外泌体用量偏少
| 增加miRNA提取时每个样品中的外泌体用量，或扩大miRNA提取体系。 |
RNA提取试剂盒不适合miRNA提取。 | 外泌体中RNA多为miRNA，且含量很低，请选择微量RNA提取试剂盒，或选择本公司生产的外泌体miRNA提取试剂盒（Ome-05）。 |
