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货号:Ome-04
规格:10 ml
外泌体蛋白提取试剂盒
(Exosomes Protein Extraction Kit)
产品编号 | 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
Ome-04 | 外泌体蛋白提取试剂(4×) | 10 ml | RT |
说明书 | 1份 |
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一、运输与存储条件。
本产品常温运输和保存,有效期2年。
二、注意事项(请使用试剂盒前阅读此注意事项)。
1. 本产品提取的外泌体蛋白已经变性,适合做Western Blot等实验,不适合做ELISA等实验。
2. 本产品提取的外泌体蛋白可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒进行蛋白定量。
3. 为了您的健康,实验过程中请穿好实验服、佩戴乳胶手套和安全眼镜。
三、产品介绍。
本产品是专门为提取外泌体蛋白而设计的裂解液,含有独特的蛋白变性试剂,可以有效裂解外泌体,得到高浓度的外泌体蛋白,用于后续的Western Blot实验等。
四、特点与优势。
1. 使用简单,与外泌体溶液混合后,即可裂解外泌体,提取外泌体蛋白。
2. 本产品兼具Loading Buffer作用,提取的外泌体蛋白溶液可以直接进行SDS-PAGE分析。
五、自备试剂。
β-巯基乙醇(β-ME)或二硫苏糖醇(DTT)。
六、使用说明。
1. 本试剂是4倍浓度的外泌体裂解试剂,与外泌体溶液按照1:3的比例混匀,100 ℃煮沸5 min。
2. 转入冰水混合物中冷却5 min,12,000 g,4 ℃离心5 min,上清转移至新的EP管。
3. 利用BCA法蛋白浓度测定试剂盒(Cat: Omp-03)测定上清液中的蛋白浓度,并计算SDS-PAGE上样体积。
4. SDS-PAGE分析。上清液中加入还原剂,如β-ME(终浓度为5%)或DTT(终浓度为10-100 mM),混匀,进行SDS-PAGE分析。
七、常见问题与分析。
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
蛋白浓度低 | 外泌体浓度较低。 | 增加外泌体浓度。 |
Western Blot实验中杂带多 | 外泌体纯度低,含有杂蛋白。 | 改进外泌体纯化方法,提高外泌体纯度。 |