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产品详情
PoIybrene ¥84.00

货号:OmL-03

规格:1mL

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Polybrene

(慢病毒感染增强试剂)

 

产品编号

试剂名称

浓度

规格

保存条件

OmL-03

Polybrene

10 mg/mL

1 mL

 4 ℃    12个月

 说明书


1


 

一、运输与存储条件

本产品室温运输,4 ℃保存,严禁冻存。

二、注意事项(请使用试剂盒前阅读此注意事项

1.   本产品4 ℃保存,严禁冻存。本产品可以在室温下短暂保存和运输,长期保存在4℃,严禁冻存,否则失效。

2.  Polybrene为即用型试剂,已过滤除菌,使用过程中,请保持无菌状态。

3.  Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次使用建议先做毒性测试。按照1:1000的比例稀释使用时,大多数细胞不会出现细胞毒性。

4.  本公司生产的慢病毒感染增强试剂盒CatOmL-04是在Polybrene基础上研发的复合型试剂,其感染增强效果是Polybrene4-8倍,可以替代Polybrene,提高慢病毒感染效率。

三、产品简介

Polybrenehexadimethrine bromide,聚凝胺)是一种多聚阳离子化合物,常用于细胞的转染实验,可以增强脂质体的转染效果,目前广泛用于提高慢病毒感染效率。

使用说明

1.    细胞培养。胰酶消化法收集细胞,接种于6孔板,24 h后细胞密度达到30-60%

2.    慢病毒感染。将含有慢病毒的细胞培养上清与新鲜的细胞培养液按不同比例混合(一般情况下等比例混合),总体积2 ml,置换原细胞培养液。

3.    Polybrene处理。按照1:500-1:2000的稀释比例,将Polybrene加入细胞培养液中,轻摇,混匀。

4.    换液。病毒感染24 h,培养细胞更换成新鲜的培养液。

5.    检测。感染72 h,检测目的基因表达水平。

 

常见问题与分析

问题

可能原因

解决方案

慢病毒感染效率低

Polybrene过期失效。

检查Polybrene是否在有效期内,并更换新的Polybrene

Polybrene冻存失效。

Polybrene冻存后效率降低,甚至失效,更换新的Polybrene试剂。

Polybrene用量偏低。

提高Polybrene的用量。

慢病毒滴度偏低。

重新包装慢病毒,提高慢病毒滴度,或纯化慢病毒,提高病毒滴度。

细胞毒性大

特定细胞株对Polybrene敏感。

减少Polybrene用量,慢病毒感染后12 h换液。

Polybrene用量偏大。

减少Polybrene用量,慢病毒感染后12 h换液。

细胞密度偏低。

增加接种细胞密度,达到50%以上。

细胞状态较差。

提高细胞状态,或更换细胞。

慢病毒滴度过高

慢病毒稀释后使用。

 

 



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