慢病毒纯化相关问题-常见问题-北京奥秘佳得医药科技有限公司

慢病毒纯化相关问题：

问题	可能原因	解决方案
纯化慢病毒滴度低	纯化前的细胞培养上清中的慢病毒滴度较低	更换成慢病毒滴度较高的细胞培养上清，重新纯化，或浓缩样品。
	含慢病毒的细胞培养上清用量较少	增加纯化体系中慢病毒上清液用量，或扩大纯化体系。
	纯化试剂过期	保证使用保质期内的试剂。
	磁珠冻存，吸附慢病毒能力降低甚至消失	更换新的磁珠或试剂盒。
	未按规定体积添加磁珠，磁珠用量减少	按照纯化体系要求，正确使用磁珠。
	未按照体系要求，随意更改体系中各试剂比例	按照纯化体系要求，按比例添加试剂盒中的各成分到纯化体系中。
	磁珠与慢病毒上清液孵育时间偏短	延长孵育时间。
	洗脱强度偏低	增加Vortex强度，延长Vortex时间。
	慢病毒上清液被微滤膜过滤，慢病毒减少	慢病毒上清液不使用滤膜孔径为0.2和0.45 μm的滤器过滤，以及更小孔径滤膜的滤器过滤。
	纯化的慢病毒溶液被微滤膜过滤，慢病毒减少	纯化的慢病毒溶液不使用滤膜孔径为0.2和0.45 μm的滤器过滤，以及更小孔径滤膜的滤器过滤。请使用试剂盒提供的大孔径滤膜过滤。
	慢病毒上清液被高速离心，导致慢病毒减少	慢病毒上清液离心条件是：1,000 rpm（100 g），4℃，离心5 min，去除细胞碎片等杂质即可。
纯化的慢病毒感染效率偏低	纯化的慢病毒用量较少	增加纯化的慢病毒用量。
	Polybrene效率偏低	使用本公司的慢病毒感染增强试剂盒。
	细胞密度偏大	慢病毒感染时，细胞密度控制在70%以下。
	细胞状态差	请使用状态较好的对数生长期细胞做慢病毒感染。
	纯化的慢病毒反复冻融，导致活性降低	纯化的慢病毒4℃保存，1个月用完。